青山区食品中黄曲霉毒素检测

微生物在粮食上生长繁殖，使粮食发生一系列的生物化学变化，造成粮食品质变劣的现象称为粮食霉变。大米、玉米、花生等粮食发生霉变会产生毒素，其中危害Zui大的主要是黄曲霉毒素，黄曲霉毒素与癌的发生关系密切。

黄曲霉毒素是食品行业重点关注的有毒代谢产物，主要由黄曲霉（Aspergillus flavus）、寄生曲霉（A. parasiticus）及特异曲霉（A. nomius）代谢产生。它的毒理学特性包括了免疫抑制性、致突性、致畸性和致癌性。黄曲霉毒素有十多种结构，以黄曲霉毒素B1毒性Zui强，且较易检出。黄曲霉毒素B1（AFB1）分子结构和性质在常规条件下无法分解，对高温、高压、射线、化学试剂（强酸、强碱）等耐受性大。黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。

利用血糖仪定量检测黄曲霉毒素B1的方法，包括以下步骤：

步骤一：制备纳米金-蔗糖酶-核酸适配体检测探针复合物；

步骤二：将黄曲霉毒素B1的单克隆抗体，4℃孵育12h；用缓冲液B冲洗；加入封闭缓冲液，室温封闭1h；用缓冲液A冲洗，完成黄曲霉毒素B1的单克隆抗体的固定；

步骤三：向步骤二的黄曲霉毒素B1的单克隆抗体中加入不同浓度的黄曲霉毒素B1待测 液，37℃孵育1h，使黄曲霉毒素B1与黄曲霉毒素B1的单克隆抗体进行特异性结合，用缓冲液 A冲洗未与单克隆抗体结合的黄曲霉毒素B1，得到黄曲霉毒素B1与单克隆抗体的结合体；

步骤四：在步骤三所得的结合体中加入步骤一制备的纳米金-蔗糖酶-核酸适配体检测 探针复合物，37℃孵育2h，形成具有夹心式结构的单克隆抗体-黄曲霉毒素B1-检测探针复 合物，未与结合体上的黄曲霉毒素B1结合的纳米金-蔗糖酶-核酸适配体检测探针复合物留在上层上清液中；

步骤五：取步骤四的上清液，加入蔗糖溶液，37℃孵育30min后，用血糖仪进行定量检测。