蔡甸区化学品急性吸入毒性测试

1、 范围

本标准规定了动物急性吸入毒性试脸的试验目的、定义、试验基本原则、试验方法。

本标准适用于评价气体、挥发性物质或气溶胶／颗粒物等化学品的急性吸入毒性作用。

2、 试验目的

检侧化学品对实验动物的急性吸人毒性作用和强度，为亚急（慢）性等吸入毒性试脸提供剂量选择的依据。

3、 试验基本原则

各试验组动物在一定时间内吸入不同浓度的受试样品，染毒浓度的选择可通过预试验确定。染毒后观察动物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡的动物要进行尸检，试验结束时仍存活的动物要处死并进行大体解剖。

4、 试验方法

4. 1 实验动物

选健康成年小鼠（18g~22g）或大鼠(180g~220g)，也可选用其他敏感动物。同性别各剂量组个体间体重相差不超过平均体重的20％。试验前动物要在试验环境中至少适应3d~5d时间。

4. 2剂量设计

根据所选方法的要求，原则上应设4~5个剂量组，每组动物一般为10只，雌雄各半。各剂量组间距大小以受试物毒性大小和动物死亡为宜，通常以较大组距和较少量动物进行预试。如果受试样品毒性很低，也可采用一次限量法，即用20只动物（雌雄各半），一般2000mg/m3，吸入4h，如未引起动物死亡，则不再进行多个剂量的急性吸入毒性试验。需要时也可做5000mg/m3，或更高浓度吸入4h，或以Zui大可能发生的浓度进行试验。

4. 3染每

染毒可采用静式染毒法或动式染毒法。

4. 3.1静式染毒法

静式染毒是将实验动物放在一定体积的密闭容器（染毒柜）内，加入一定量的受试样品，并使其挥发，造成试验需要的受试样品浓度的空气，一次吸人性染毒2h或4h。

4. 3.1.1染毒柜的容积以每只染毒小鼠每小时不少于3L空气计，每只大鼠每小时不少于30L计。

4.3.1.2染毒浓度的计算：染毒浓度一般应采用实际侧定浓度。在染毒期间一般可测4~5次，求其平均浓度。在无适当侧试方法时。可用式（1）计算染毒浓度：

c=（a×d/V) ×106· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· ·（1)式中：

c——染毒浓度，单位为毫克每立方米（mg/m3);

a——加入受试样品的量，单位为毫升（mL);

d——化学品相对密度;

V——染毒柜容积，单位为升（L）。

4. 3.2动式染毒法

动式染毒是采用机械通风装置，连续不断地将含有一定浓度受试样品的空气均匀不断地送入染毒柜，空气交换量大约为12次／h~15次／h，并排出等量的染毒气体，维持相对稳定的染毒浓度（对通过染毒柜的流动气体应不间断地进行监侧，并至少记录2次）。一次吸入性染毒2h。当受试化合物需要特殊要求时，应用其他的气流速率。染毒时，染毒柜内应确保至少有19％的氧含量和均衡分配的染毒气体。一般情况下，为确保染毒柜内空气稳定，试验动物的体积不应超过染毒柜体积的5％。且染毒柜内应维持徽弱的负压，以防受试样品泄露污染周围环境。应注意防止受试样品爆炸。

4. 3.2.1受试样品气化（雾化）和输入的常用方法

4. 3.2.1.1气体受试样品，经流量统计与空气混合成一定浓度后，直接输入染毒柜。

4. 3.2.1.2易挥发液体受试样品，通过空气鼓泡或适当加热促使挥发后输入染毒柜。

4. 3.2.1.3若受试样品现场使用时采取喷雾法时，可采用喷雾器或超声雾化器使其雾化为气溶胶后输入染毒柜。

4. 3.2.2染毒浓度计算

染毒浓度一般应采用动物呼吸带实际侧定浓度，至少每半小时一次，取其平均值。各侧定浓度值应在其平均值的25％以内。若无适当的侧试方法，也可采用式（2）计算染毒浓度:

c= [a×d/（V1+ V2) ] ×106· · ·· · ···· · ··· ·· · ·（2)

式中：

a——气化或雾化受试样品的量，单位为毫升（mL);

d——受试样品相对密度;

V1——输入染毒柜风量，单位为升（L）。

V2——染毒柜容积，单位为升（L）。

4. 4 观察期限及指标

4. 4.1 观察并记录染毒过程和观察期内的动物中毒和死亡情况。观察期限一般为14d。

4. 4.2 对死亡动物进行尸检。观察期结束后，处死存活动物并进行大体解剖，必耍时，进行病理组织学检查。

5、 试验结果评价

评价试验结果时，应将LC50与观察到的毒性效应和尸检所见相结合考虑，LC50值是受试样品急性毒性分级和标识以及判定受试样品经呼吸道吸入后引起动物死亡可能性大小的依据。引用LC50值时一定要注明所用实验动物的种属、性别、染毒方式及时间长短、观察期限。评价应包括动物接触受试样品与动物异常表现（包括行为和临床改变、大体损伤、体重变化、致死效应及其他毒性作用）的发生率和严重程度之间的关系。