纯净水菌落总数检测，纯净水检测机构

 纯净水指的是不含杂质的H2O，简称净水或纯水，是纯洁、干净，不含有杂质或细菌的水，如有机污染物、无机盐、任何添加剂和各类杂质，是以符合生活饮用水卫生标准的水为原水。通过电渗析器法、离子交换器法、反渗透法、蒸馏法及其他适当的加工方法制得而成，密封于容器内，且不含任何添加物，无色透明，可直接饮用。市场上出售的太空水，蒸馏水均为纯净水。判断水质是否为纯净水，就需要对其进行检测分析。以下就是纯净水菌落总数测定方法。

1 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

1.1 恒温培养箱：36℃±1℃，30℃±1℃。

1.2 冰箱：2℃～5℃。

1.3 恒温水浴箱：46℃±1℃。

1.4 天平：感量0.1 g。

1.5 均质器。

1.6 振荡器。

1.7 无菌吸管：1 mL(具有0.01 mL刻度)、10 mL(具有0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。

1.8 无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL。

1.9 无菌培养皿：直径90 mm。

1.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。

1.11 放大镜或(和)菌落计数器。

2 培养基和试剂

2.1 平板计数琼脂培养基。

2.2 磷酸盐缓冲液

2.3 无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000 mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。

2.4 1mol/L氢氧化钠(NaOH)：称取40g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中。

2.5 1mol/L盐酸(HCl)：移取浓盐酸90mL，用蒸馏水稀释至1000mL。

2.6 菌落总数测试片和压板。

3 检验程序

4 操作步骤

4.1 样品的稀释

4.1.1 以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中，充分混匀，制成1：10的样品匀液。

4.1.2用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头不要触及稀释液面)，振摇试管或换用一支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。

4.1.3 按6.4.1.2操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用一次1mL无菌吸管或吸头。

4.1.4根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液)，在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液加入两个无菌平皿内。分别取1mL稀释液加入两个无菌平皿作空白对照。4.1.5及时将15mL～20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。

4.2 培养

4.2.1 琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。

4.2.2如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(4mL)，凝固后翻转平板，按6.4.2.1条件进行培养。

4.3 菌落计数

可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-formingunits,CFU)表示。

4.3.1 选取菌落数在30 CFU～300 CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

检样 25ml样品+225ml稀释液，均质 10倍系列稀释 选择2个～3个适宜样品匀液， 各取1mL分别加入无菌培养皿内每皿中加入15mL～20mL 平板计数琼脂培养基，混匀 计算菌落总数 报告 36℃±1℃ 48h±2h 培养计算各平板菌落数。

4.3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。

4.3.3 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。