1范围
本标准规定了饲料中异硫氰酸酯的气相色谱测定方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料﹑精料补充料和饲料原料中异硫氰酸酯的测定。本标准的检出限为2 mg/kg,定量限为5mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其Zui新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 5520粮油检验发芽试验
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T20195动物饲料试样的制备
3原理
试样中的硫葡萄糖苷在pH7.0缓冲液中,在白芥子酶作用下生成丙烯基异硫氰酸酯、丁烯基异硫氰酸酯和戊烯基异硫氰酸酯,用二氯甲烷提取﹐脱水、过滤后以气相色谱仪测定,内标法定量,结果以丙烯基异硫氰酸酯计。
4试剂或材料
除非另有规定,仅使用分析纯试剂。
4.1 水:GB/T 6682,一级。
4.2二氯甲烷。
4.3 石油醚(沸程30 ℃~60 ℃)。4.4 无水硫酸钠。
4.5柠檬酸溶液(0.l mol/L):准确称取4.20 g柠檬酸(C。HIgO。·HI,O)溶解于水中,用水稀释并定容至200mL,混匀。临用现配。
4.6磷酸氢二钠溶液(0.2 mol/L) :准确称取28.39 g无水磷酸氢二钠(Na,HIPO,)溶解于水中,用水稀释并定容至1 L,混匀。临用现配。
4.7盐酸溶液(0.0l mol/L):准确移取0.9 mL浓盐酸,用水稀释并定容至ⅠL,混匀。
4.8氢氧化钠溶液(0.0l mol/L):准确称取0.40 g 氢氧化钠加水溶解,用水稀释并定容至Ⅰl,混匀。4.9pHl7.0缓冲溶液:量取176.5 mL柠檬酸溶液(4.5)于1 000 ml容量瓶中,用磷酸氢二钠溶液(4.6)稀释并定容至l000 mL,混匀,用盐酸溶液(4.7)或氢氧化钠溶液(4.8)调整pH 至7.0。临用现配。4.10白芥子酶:称取50g白芥(Sina pis alba l.)种子(按照GB/T 5520做发芽试验,72h内发芽率应大于85%,保存期不超过两年)粉碎后,置于500 ml.烧杯中,加入100mL石油醚(4.3),搅拌2min,静置,弃去上层液体,重复脱脂10次,使脂肪含量低于2%,置通风橱内使溶剂挥干﹐然后再粉碎一次，
