这些抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体还可用于通过免l疫组织化学监测细胞和组织中Arf 6的激l活。
NewEast Biosciences Arf6激l活测定试剂盒提供了一种简单且快速的方法来监测Arf6的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。
NewEast Biosciences Arf 6激l活检测试剂盒基于特定于配置的抗Arf6-GTP单克l隆抗l体,可从细胞提取物或体外载有GTPγS的Arf 6激l活检测方法来测量活性Arf 6-GTP水平。简而言之,抗活性的Arf 6小鼠单克l隆抗l体将与含有Arf 6-GTP的细胞裂解液一起孵育。 然后,结合的活性Arf 6将被蛋白A/ G琼脂糖拉低。 分别使用抗Arf 6兔多克l隆抗l体通过免l疫印迹分析检测沉淀的活性Arf 6。
体外用GTPγS/GDP处理蛋白以用作阳性和阴性的对照
注意:在细胞体内环境条件下大约有10%的Cdc42被激l活,而在体外用GTPγS处理大约有90%的Cdc42被激l活。
1. 准备两个离心管,Rac kit,每个管中各加入0.5mL的细胞提取物(如果是纯的Cdc42蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug)。
2. 每个管中加入20ul 0.5M EDTA(终浓度即为20 mM)。
3. 一个管中加入5ul的100X GTPγS(终浓度即为100 uM)作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100XGDP(终浓度即为1 mM)作为阴性对照。
4. 将离心管置于30°C条件下反应30min并不断搅动。
5. 终止反应:将管置于冰上并加入32.5ul 1M MgCl2(终浓度即为60mM)。
基因符号:RAB11
说明:抗活性Rab11小鼠单克l隆抗l体
背景:Rab系列的小GTP酶是控制膜运输的机械的关键要素。 Rab11已显示可控制通过回收内体的运输。
免l疫原:活性Rab11的重组全长蛋白
应用范围:IP,IHC
推荐的稀释液:IP:1μg,用于1?2 mg总细胞蛋白
IHC:1:50?100稀释
浓度:1 mg / ml
格式:液体
同种型:IgG2b
纯度:从腹l水中纯化
存储缓冲区:
防腐剂:否
成分:PBS(不含Mg2 +和Ca2 +),pH 7.4、150 mM NaCl,50%甘油
种属反应性:抗活性Rab11抗l体识别来自脊椎动物的活性Rab11。
储存条件:储存于-20°C。 避免冻结/解冻周期
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