试剂制备
1X Assay/LysisBuffer：实验前用去离子水将5X的Assay/Lysis缓冲液稀释成1X的缓冲液，并在使用前加入蛋白酶抑制l剂如1 mMPMSF， 10 μg/mL leupeptin（亮肽素），或 10 μg/mL aprotinin（抑肽酶）。
样品处理
贴壁细胞
1. 培养细胞密度达到大约80%-90%之间（直径10 cm培养皿，~107个细胞），并用活性剂或抑制l剂进行处理。
2. 吸去培养基并用冰冷的PBS洗涤两次。
3. 向细胞中加入1X Assay/Lysis缓冲液（每个直径10cm的组织培养皿中加入0.5-1mL）。
4. 将培养皿放置于冰上处理10-20分钟。
5. 用细胞刮棒把细胞从培养皿下分离下来。
6. 将细胞裂解物转入合适的管中并放置于冰上。
7.如果核发生裂解，细胞裂解物可能会变得非常的粘稠并且难以吸取。当这种情况出现时，将细胞裂解物用27?的注射l器针头来回吸取3-4次，以破坏基因组DNA，G蛋白活性检测试剂盒，从而避免上述情况的出现。
8. 4°C 12000 g， 离心10 min。
9. 收集上清（~1-2 mg总蛋白）并放置于冰上使用。如果样品不立即使用，请将处理后的样品存放于-70°C条件下。
纽斯特生物技术有限公司推出的Cdc42活性检测试剂盒主要是依据单克l隆抗l体能够特异性的识别Cdc42-GTP结合蛋白，而不识别Cdc42-GDP结合蛋白，进而简单并且快速的进行Cdc42的活性检测。同时试剂盒中的Cdc42-GTP单克l隆抗l体也可以进行免l疫组化实验中细胞和组织中Cdc42的活性监测。每套试剂盒可以进行20次检测。
小G蛋白是从属于细胞调节因子中的一个超家族。Rho家族是小G蛋白中的一个亚家族，它在细胞运动、细胞分裂以及基因转录中发挥主要作用。而本试剂盒中的Cdc42就属于Rho亚家族中的一种，Cdc42参与生理活动过程中其分子结构会呈现出2种相互转换的形式：与GTP结合的激l活状态和与GDP结合的非活性状态。
目前Cdc42蛋白活性的检测主要是依据小GTP酶Cdc42可以与p21活化激酶（PAK）的p21结合区域（PBD）结合，使PAK活化从而发挥生物学功能，进而间接的进行Cdc42活性l功能的监测。然而此方法在检测过程中存在着一定的局限性比如GTP水解成GDP的速度过快以及Cdc42-GTP结合蛋白与p21结合区域之间较低的亲和力，导致这种检测方法的重复性较差。
G蛋白活性检测试剂盒-武汉纽斯特生物技术(图)由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司是从事“G蛋白活性,cAMP和cGMPELISA试剂盒,蛋白点突变”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：黄经理。